جهش زایی هدایت یافته مکانی به منظور تولید پروتئین جهش یافتهY45W حاوی جهش (Oriza sativa) NSLTP2

Site directed mutagenesis to produce mutant Iranian rice- NSLTP2 (Oriza sativa) protein that contains Y45Wmutation


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
چکیده مقاله
چکیده مقاله
نویسندگان
نویسندگان
دانلود مقاله
دانلود مقاله
علوم پزشکی اراک
علوم پزشکی اراک

نویسندگان: حمید ابطحی , زهرا اسلامی راد , عبدالرحیم صادقی

کلمات کلیدی:

نشریه: ---- عنوان نشریه در لیست موجود نیست ----, 1,28,1 - 8,2015

اطلاعات کلی مقاله
hide/show

کد مقاله 3122
عنوان فارسی مقاله جهش زایی هدایت یافته مکانی به منظور تولید پروتئین جهش یافتهY45W حاوی جهش (Oriza sativa) NSLTP2
عنوان لاتین مقاله Site directed mutagenesis to produce mutant Iranian rice- NSLTP2 (Oriza sativa) protein that contains Y45Wmutation
نوع مقاله بر حسب نگارش پژوهشی اصیل
مقاله برحسب نمایه isc
IF 0.0
عنوان نشریه مجله پژوهش های سلولی و مولکولی (زیست شناسی ایران)
نوع نشریه علمی پژوهشی
شماره نشریه 1
دوره 28
صفحه شروع و پایان در نشریه 1 - 8
سال انتشار/ ارائه شمسی 1394
سال انتشار/ارائه میلادی 2015
آدرس لینک مقاله/ همایش در شبکه اینترنت http://cell.ijbio.ir/article_503_70.html
ISSN 2383-2738
DOI
آدرس علمی (Affiliation) نویسنده متقاضی Center of Moleculer Medicine Research, Faculty of Medicine, Medical University of Irak, Arak , I.R. of Iran

چکیده مقاله
hide/show

عنوان متن
چکیده انگلیسیعنوان مقاله [English] Site directed mutagenesis to produce mutant Iranian rice-NSLTP2 (Oriza sativa) protein that contains Y45Wmutation چکیده [English] NSLTPs are plant proteins that are subdivided into nsLTP1(9kDa) and nsLTP2 (7kDa) according to the molecular weight. These highly stable proteins can protect drugs against oxidation or degradations. Rice NsLTP2 due to the inherent ability to cross biological membranes and bind to steroid compounds (including some pharmaceutical compounds) have potential application for use in drug delivery systems. After designing of mutagenic primers (contains a mutation of (Y45W)) the method of SOE-PCR (splicing by overlap extension-polymerase chain reaction) is used to site directed mutagenesis in the gene encoding the rice nsLTP2. Wild type nsLTP2 was cloned in to the PGEX6p2 vector. This wild type plasmid was used as a template for constructing the mutant fragment and designed mutant primers are used for amplification of mutant fragments. Mutant rice nsLTP2 are expressed in the pET32a vector in to the E.coli BL21(DE3) strain. After the amplification of the mutant fragments and confirmation of mutations generated by sequencing, the mutant constructs cloned into the pET32a vector and the fusion mutant protein with a His-tag was purified by Ni-NTA Affinity chromatography column. The purpose of this study is Site directed mutagenesis to production the mutant Iranian rice-NSLTP2 (Oriza sativa) protein that contains Y45Wmutation. We hope that, in the future, these findings could contribute that this protein could be used to create biosensors or act as drug carriers. کلیدواژگان [English] mutagenesis, SOE-PCR, Drug Delivery System
چکیدهجهش زایی هدایت یافته مکانی به منظور تولید پروتئین جهش یافته Iranian rice-NSLTP2 ( Oriza sativa) حاوی جهش Y45W نویسندگان اعظم احمدی1 ؛ مهران میراولیائی 2 ؛ مجید متولی باشی1 ؛ عبدالرحیم صادقی3 ؛ حمید ابطحی4 ؛ زهرا اسلامی4 چکیده NSLTP (nonspecific lipid transfer protein) ها پروتئین ‌هایی گیاهی هستند که بر اساس وزن مولکولی به دو گروه nsLTP1 و nsLTP2 تقسیم بندی می ‌شوند. این پروتئین ها بسیار مقاوم هستند و علاوه بر پتانسیل حمل داروها می ‌توانند آن ‌ها را در برابر اکسیداسیون یا تجزیه شدن محافظت کنند. مولکول nsLTP2 گیاه برنج ، پروتئینی است که به دلیل توانایی ذاتی عبور از غشا و اتصال به ترکیبات استروئیدی (از جمله برخی ترکیبات داروئی) پتانسیل استفاده در سیستم تحویل داروئی را دارد. در این تحقیق با هدف افزایش خاصیت فلورسانس در ژن Iranian rice nsltp2 ( Oriza sativa)، جهش‌ های هدایت یافته مکانی ایجاد گردید. برای ایجاد جهش از تکنیک SOE-PCR (splicing by overlap extension-polymerase chain reaction) به منظور اعمال جهش (تبدیل کننده اسیدآمینه تیروزین شماره 45 به تریپتوفان (Y45W)) در ژن کد کننده nsLTP2 برنج استفاده شد. مطالعات انجام شده بر روی سایر ګونه های این مولکول حاکی از افزایش خاصیت فلورسانس در اثر ایجاد این نوع جهش می باشد. در مرحله بعد با تکثیر قطعات جهش یافته و تایید جهش ایجاد شده توسط سکوئنسینگ، محصول جهش یافته درون وکتور pET32-a کلون و پس از بیان در سویه بیانی BL21(DE3)pLYSs، پروتئین تغییر یافته فیوژن باHis-tag ، تخلیص و وجود این پروتئین با استفاده از وسترن بلات تایید گردید. امید می ‌رود در تحقیقات آتی از این پروتئین بتوان به عنوان یک انتقال دهنده داروئی به خصوص داروهای درمان سرطان استفاده نمود. کلیدواژگان جهش زایی؛ SOE-PCR؛ سیستم تحویل داروئی
کلمات کلیدی
نام فایل عنوان پیوست تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
3122.pdfچکیده فارسی1395/02/2475678دانلود
3122..pdfچکیده لاتین1395/02/2480218دانلود

نویسندگان
hide/show

نویسنده نفر چندم مقاله
حمید ابطحیچهارم
زهرا اسلامی رادپنجم
عبدالرحیم صادقیسوم

لینک دانلود مقاله
hide/show

نام فایل عنوان پیوست تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود